Выделение вируса на куриных эмбрионах

Куриные эмбрионы чувствительны к большинсту вирусов птиц и к некоторым вирусам млекопитающих (болезни Ньюкасла, гриппа, оспы птиц, ПГ-3 др.). Используют куриные эмбрионы от 5-го до 12-го дня инкубации. Вирусы в них могут репродуцироваться в клетках самого зародыша, хорионаллантоисной (ХАО) и амниотической оболочках, в стенках желточного мешка, накакапливается в этих структурах и в жидкостях аллантоисной и амниотической полостей. В разных структурах могут репродуцироваться различные вирусы.

Разработано несколько методов заражения куриных эмбрионов, но в практике чаще используют слудующие методы:

l на ХАО- например, вирусы оспы птиц и др.;

l в аллантоисную полость- вирусы гриппа, ПГ-3 крупного рогатого скота, вирус болезни Ньюкасла и др.;

l в амниотическую полость- вирусы риппа;

l в желточный мешок- вирус ринопневмании лошадей.

В редких случаях используют метод заражения куриных эмбрионов в тело зародыша и в кровеносные сосуды ХАО.

Обнаружить вирус в куриных эмбрионах можно по следующим признакам:

l по гибели зародыша в определенные характерные для соответствующего вируса сроки инкубации;

l по патологоанатомическим изменениям в структурах куриного эмбриона, например, белые узелки (оспины) при оспе птиц, инфекционном ларинготрахеите кур и друих инфекциях или желто-зеленый цвет аллантоисной жидкости при гепатите утят и т.п.;

l по реакции гемагглютинации ( для обнаружения гемагглютинирующих вирусов, например, вируса болезни Ньюкасла, гриппа,ПГ-З и др.) При наличии вируса в эмбриональной жидкости куриного эмбриога через 3-7 мин после смешивания капли вируссодержащей жидкости и капли взвести эритроцитов соответствующего вида животного образуются хлопья эритроцитов (агглютинация) . Так, для выявления вируса ПГ-3 крупного рогатого скота используют эритроциты морской свинки, вирусов гриппа- эритроциты кур и т.д.